本文定义并回顾了干细胞疗法作为各种疾病的有希望的治疗选择的潜力。它还讨论和定义了干细胞及其在再生医学领域的重要性。
什么是干细胞疗法?
干细胞疗法是一种再生医学,旨在通过减少炎症和调节免疫系统来修复体内受损的细胞。这种现象使干细胞疗法成为适用于各种疾病的可行治疗选择。 干细胞疗法已被用于治疗自身免疫、炎症、神经、骨科疾病和外伤,并进行了关于克罗恩病、多发性硬化症、狼疮、慢性阻塞性肺病、帕金森氏症、肌萎缩性侧索硬化症、中风康复等的研究。
虽然新的干细胞疗法不一定能治愈这些病症,但前提是让身体能够很好地自我修复,以缓解长期需要的症状。在许多情况下,这种作用可以显着提高患者的生活质量并延缓疾病进展。
干细胞疗法的定义
干细胞疗法是一种再生医学,旨在通过减少炎症和调节免疫系统来修复体内受损的细胞。它可用于治疗多种疾病,例如自身免疫性疾病、炎症和神经系统疾病。
有几种类型的干细胞治疗可用,包括羊水干细胞治疗和脐带干细胞治疗。FDA 批准的最常见的基于干细胞的疗法是造血干细胞移植,可治疗白血病等血癌。干细胞还可以再生治疗严重的皮肤烧伤和严重受损的角膜。
干细胞疗法有什么作用?
干细胞疗法是一种再生医学,它利用干细胞或其衍生物来刺激身体自身的愈合过程并修复受损、患病或受伤的组织。这种方法代表了移植领域一个有前途的新领域,因为它利用细胞的力量而不是依赖有限的供体器官供应。
成体干细胞在现代医学治疗中的应用
间充质干细胞 (MSC) 是许多身体组织中的一种成体干细胞,包括骨髓、脂肪组织和肌肉。MSCs可以分化成骨、软骨和脂肪细胞。
MSCs 已显示出作为各种疾病和病症的再生疗法的前景。在临床前和临床研究中,MSCs已被证明具有抗炎和免疫调节作用,可引发积极的免疫反应。它们已被用于治疗人类疾病,包括自身免疫性疾病、退行性神经系统疾病、脊髓损伤、关节痛和其他影响人类疾病的疾病。
使用MSCs进行干细胞治疗的主要好处之一是它们可以很容易地从各种来源获得并在实验室中扩展。MSC的免疫排斥风险也较低,因为它们的免疫原性低于其他干细胞。
总的来说,使用MSCs进行干细胞治疗对治疗各种疾病和病症具有广阔的前景。虽然需要更多的研究来充分了解这些细胞的潜力并使用MSC开发安全有效的治疗方法,但早期结果令人鼓舞。MSC有潜力成为再生医学领域的宝贵工具。
再生医学的一种形式
再生医学是一个多学科领域,涉及更换、修复或再生受损的身体器官、组织和细胞。它是一种基于细胞的疗法,包括注射干细胞或祖细胞以及通过生物活性分子诱导生成。移植细胞的目标是通过减轻症状和稳定医疗状况来减轻人类疾病的影响。
每个成人身体细胞都具有再生特性,可以重新编程以修复或替换由于年龄、疾病、损伤或遗传影响而丧失的组织或器官功能。
再生医学有可能彻底改变我们治疗疾病的方式,并且现在正在利用这些原则进行治疗。这些治疗包括利用身体的自然能力以多种方式进行自我修复,例如修复皮肤伤口和修复骨折。
什么是干细胞?
干细胞是专门的人类细胞,可以在体内发育成许多不同类型的细胞。在生物学中,干细胞是生物体中未发育的细胞,能够产生无限多的相同类型的细胞。干细胞也可以通过称为分化的过程变成某些其他类型的细胞。干细胞作为身体修复系统,可以产生健康的细胞来替换那些受疾病影响的细胞。
干细胞从何而来?
干细胞可以从多种来源获得,包括:脐带组织、脐带血、骨髓、脂肪(脂肪)组织、胎盘组织、牙髓和胚胎。干细胞主要有两种类型:来自胚胎的胚胎干细胞和来自完全发育的组织(如大脑、皮肤、脐带组织和骨髓)的成体干细胞。第三种人类工程干细胞(诱导多能干细胞)是成体干细胞,它们在实验室中被改造得更像胚胎干细胞。有几种不同类型的干细胞,包括:
- 胚胎干细胞 (ESC)
- 成体干细胞 (ASC)
- 诱导多能干细胞 (iPSC)
1. 胚胎干细胞(多能干细胞)
胚胎干细胞 (ESC) 是一种源自胚泡内细胞团的干细胞,胚泡是胚胎发育的非常早期阶段。胚胎干细胞位于内部细胞团中,被科学家称为全能细胞。人类胚胎干细胞可以在体内分化成任何细胞类型,并可能用于各种医学目的,包括组织修复和再生医学。
胚胎干细胞通常被称为人类多能干细胞,它可以产生许多不同的细胞类型。这与“多能”干细胞形成对比,后者只能分化为有限数量的细胞类型。多能干细胞是非特化的,不具备使它们能够在特定组织中执行特定功能的特定特征(例如形状或基因表达模式)。
胚胎干细胞通常在实验室中作为“干细胞系”生长,这是人类细胞的培养物,可以维持和扩增以增加多能干细胞的总量。几个人类胚胎干细胞系已经建立并用于研究目的。
围绕胚胎干细胞的争议
胚胎干细胞的使用是一个有争议的话题,因为需要破坏胚胎才能获得它们。这引起了伦理方面的担忧,许多国家的法律和指南都对胚胎干细胞的使用进行了规范。尽管存在这些争议,但对胚胎干细胞的研究使人们对细胞分化有了更好的了解。胚胎干细胞有可能用于开发针对多种疾病和病症的新疗法。
小鼠胚胎干细胞研究显示独特的分化细胞类型
一项使用小鼠胚胎干细胞 (mESC) 的研究于 2002 年发表在《自然》杂志上。在这项研究中,作者证明 mESC可用于在培养物中产生功能性神经元。
为了产生神经元,研究人员用生长因子和其他信号分子的组合处理胚胎干细胞,诱导细胞分化为神经元。由此产生的神经元能够与其他神经元形成功能性突触或连接,并以类似于大脑发育中的神经元的方式对刺激做出反应。
这项研究表明,胚胎干细胞具有分化为功能性神经元的潜力,这提高了胚胎干细胞可用于研究神经系统发育和潜在开发神经系统疾病治疗方法的可能性。
值得注意的是,这项研究是在实验室进行的,需要更多的研究来充分了解胚胎干细胞的潜力,并使用这些细胞开发安全有效的疗法。
你能在临床环境中使用胚胎干细胞吗?
虽然胚胎干细胞在实验室研究和动物模型中显示出巨大潜力,但它们尚未广泛用于人类治疗。这是因为在更广泛地使用它们之前,需要解决许多伦理和技术挑战。
围绕胚胎干细胞使用的主要伦理问题之一是它们来源于人类胚胎,这引发了对胚胎道德地位的质疑。此外,获得胚胎干细胞的过程需要破坏胚胎,这受到一些人出于道德或宗教原因的反对。
在胚胎干细胞更广泛地用于治疗之前,还需要克服技术挑战。例如,科学家需要开发控制胚胎干细胞分化为特定细胞类型的方法,他们需要找到防止细胞移植到体内时形成癌细胞的方法。
2. 成体干细胞
成体干细胞是存在于全身各种组织中的未分化细胞,可以分化成不同的细胞类型。这些细胞在维持它们所在的组织方面发挥着至关重要的作用,并有可能用于组织修复和再生医学。
干细胞研究发现,成体干细胞存在于完全发育的组织和器官中,与胚胎干细胞不同,胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团。成体干细胞的分化能力比胚胎干细胞更有限,它们通常被称为“多能”而不是“多能”。
有几种不同类型的成体干细胞,包括产生血细胞的造血干细胞和可以分化成骨骼、软骨和脂肪细胞的间充质干细胞。造血干细胞也称为围产期干细胞,也可以来源于脐带血细胞——这种类型的干细胞必须与患者的HLA相匹配,以避免免疫排斥。
成体细胞已被广泛研究
成体干细胞,也称为成体干细胞,已成为许多科学研究的主题,并有可能用于治疗多种疾病和病症,包括糖尿病、帕金森病、脊髓损伤和慢性炎症,甚至有助于减缓整体衰老过程。
值得注意的是,使用成体干细胞仍然是一个活跃的研究领域。需要更多的研究来充分了解这些细胞的潜力,并使用成体干细胞开发安全有效的疗法。
干细胞可以通过称为分化的过程修复组织
成体干细胞存在于全身的各种组织中,包括脂肪细胞、脐带组织和骨髓。成熟的干细胞可以分化成多种细胞类型,包括:皮肤细胞、肌肉细胞、脑细胞、心肌细胞、神经细胞、心脏细胞和成人组织。
什么是间充质干细胞?
间充质干细胞是具有自我更新、免疫调节、抗炎、信号转导、细胞分裂和分化特性的成体干细胞。MSCs 自我更新能力的特点是它们能够在特定组织或器官中分裂和发育成多种特化细胞类型。当置于细胞培养物中并进行体外受精时,MSC可能会成为独特的干细胞类型并产生更多的干细胞。(体外受精可以帮助在实验室环境中培养干细胞。MSC还可以替代受损或患病的细胞。MSC可以来源于多种组织,包括脂肪组织(脂肪)、骨髓、脐带组织、血液、肝、牙髓和皮肤。
临床试验和间充质干细胞
MSCs因其具有自我更新、分化、抗炎和免疫调节等特性而被广泛用于治疗各种疾病。体外(在实验室环境中进行)和体内(在活生物体中进行)研究支持了解MSC治疗在临床应用中的机制、安全性和有效性。(3)
根据 Biehl 等人最近进行的一项研究,“干细胞的两个定义特征是永久的自我更新和分化成专门的成体细胞类型的能力。” (1)
3. 诱导多能干细胞
诱导多能干细胞 (iPSC) 经过基因重编程,具有胚胎干细胞的特征。它们是通过使用病毒载体或其他方法将特定基因引入成体细胞(例如皮肤细胞)而产生的。由此产生的细胞称为iPSC,可以自我更新并分化成体内的任何细胞类型,类似于胚胎干细胞。
iPSC的主要优势之一是它们可以从患者自身的细胞中产生,这消除了与使用胚胎干细胞或供体干细胞相关的免疫排斥风险。这使得iPSC成为个性化医疗和组织修复的潜在有用工具。
iPSC一直是许多科学研究的主题。它们有可能用于各种医学目的,包括药物开发和测试、疾病建模和基于细胞的疗法。然而,需要更多的研究来充分了解iPSC的潜力并使用这些细胞开发安全有效的治疗方法。
值得注意的是,iPs细胞的使用是一个相对较新的研究领域,需要更多的研究来充分了解这些细胞的潜力并开发使用iPSCs的安全有效疗法。
什么是骨髓干细胞,它们有危险吗?
骨髓干细胞是存在于骨髓或循环系统中的多能干细胞,是造血系统所有元素的前体。它们可以分化成粒细胞和单核细胞,统称为髓样细胞,它们受不同的转录因子控制。
髓样细胞可发展为髓系恶性肿瘤,例如急性髓系白血病 (AML)。这些干细胞的生长和繁殖受白细胞介素 3 等生长因子的控制,一张综合图显示了它们从造血干细胞到骨髓和淋巴谱系成熟细胞的发育过程。
间充质干细胞从何而来?
间充质干细胞可以从许多不同的来源获得。干细胞研究表明,这些包括脂肪(脂肪组织)、脐带组织、胎盘组织、脐带血或骨髓。您可以在此处详细了解间充质干细胞的特定来源和干细胞治疗。间充质干细胞是具有自我更新、免疫调节、抗炎、信号传导和分化特性的成体干细胞。 间充质干细胞 (MSC) 的自我更新能力的特点是它们能够在特定组织或器官中分裂和发育成多种特化细胞类型。
间充质干细胞 (MSC) 可来源于多种组织,包括脂肪组织(脂肪)、骨髓、脐带组织、血液、肝脏、牙髓和皮肤。
间充质干细胞可以变成神经干细胞
MSC可以分化成组织特异性干细胞,包括骨骼细胞、软骨细胞、心肌细胞、脑细胞和脂肪组织。虽然MSC 通常不被认为是神经细胞,但一些研究表明,MSC 在特定条件下可以分化为具有神经特征的细胞。
一项研究发现,用特定生长因子处理并暴露于神经诱导培养基的MSCs可以分化成具有神经元和神经胶质细胞特征的细胞,神经胶质细胞是支持和保护神经系统神经元的细胞类型。
然而,间充质干细胞分化成功能齐全的神经细胞的程度仍不确定。需要更多的研究来充分了解MSCs分化成神经细胞的潜力以及 MSCs 在治疗神经疾病方面的潜在用途。
干细胞疗法如何发挥作用?
干细胞疗法通过利用干细胞的自我更新、免疫调节、抗炎、信号传导和分化特性来影响体内的积极变化。间充质干细胞 (MSC) 还具有通过分裂和发育成存在于特定组织或器官中的多种特化细胞类型来自我更新的能力。间充质干细胞是成体干细胞,这意味着它们不存在伦理问题,MSC并非来源于胚胎材料。
“不存在重大伦理问题、免疫原性低和具有免疫调节功能的特点使MSCs成为干细胞治疗的有希望的候选者。” – 姜等。(10)
如何管理干细胞?
干细胞可以以多种方式施用;IV干细胞疗法(静脉内给药)、鞘内(直接进入椎管)、向问题区域(膝盖、臀部、手等)注射干细胞。干细胞研究发现,不同的给药方法会对患者产生不同的影响,因此在选择给药途径之前应全面考虑。
世界上最好的干细胞治疗是什么?
很难明确地说出世界上最好的干细胞疗法是什么,因为这取决于所治疗的医疗条件和所使用的干细胞的具体类型。然而,研究表明,成人间充质干细胞 (MSC) 在多种医学条件下都显示出可喜的结果,被认为是一种安全有效的治疗选择。
什么是干细胞移植?
干细胞移植是一种程序,患者接受健康的干细胞来替换受损的干细胞。干细胞可能来自患者自己的身体(自体)或来自捐赠者(同种异体)。在移植之前,患者会接受高剂量的化学疗法,有时还会接受放射疗法,为身体移植做好准备。接下来是清除骨髓干细胞并替换它们。自体干细胞移植比同种异体移植具有一些优势,例如防止潜在的血癌。
干细胞移植用于什么条件?
干细胞移植用于治疗患有危及生命的癌症或由异常血细胞引起的血液病,例如几种类型的白血病、淋巴瘤和睾丸癌。
它还可用于治疗多发性骨髓瘤和某些类型的白血病等疾病,在这些疾病中,由于称为移植物抗肿瘤的效应,干细胞移植可能直接对抗癌症。
造血干细胞已被用于治愈数以千计的癌症患者,但这种治疗存在严重的风险。美国国家骨髓捐赠计划提供了一份完整的可通过造血干细胞移植治疗的疾病清单。
干细胞靶向炎症
干细胞作为多种疾病的潜在疗法的治疗用途已得到广泛探索,在过去几年中,使用间充质干细胞进行的临床试验数量呈指数级增长。(4)
干细胞具有独特的内在特性,可以吸引它们在体内发生炎症。研究表明,干细胞治疗可以再生受损或患病的组织,减少炎症并调节免疫系统,从而促进更好的健康和生活质量。间充质干细胞通过旁分泌效应(细胞信号以改变现有细胞的行为)或直接细胞间接触影响组织修复来做到这一点。
“
MSC能够迁移并专门播种到受损的组织部位,在那里它们可以分化成功能性细胞以替换受损或患病的细胞”(4)
Mao F. 等人进行的基于干细胞的研究。发现源自脐带组织 (MSC) 的间充质干细胞通过涉及自我更新和分化的机制促进组织再生,支持血管生成和组织细胞存活,并限制炎症。”(3)
如何使用干细胞?
MSCs由于其自我更新、分化、抗炎和免疫调节特性而广泛用于各种干细胞治疗。体外(在实验室环境中进行)和体内(在活生物体中进行)研究支持了对MSC治疗在临床应用中的机制、安全性和有效性的理解。(3)
根据Biehl等人的说法,“干细胞的两个定义特征是永久的自我更新和分化成专门的成体细胞类型的能力。” (1)
干细胞疗法
干细胞疗法是指使用干细胞治疗或预防疾病或病症。干细胞是一种能够分化成许多不同类型细胞的细胞,它们具有自我更新的能力,这意味着它们可以分裂并产生更多的干细胞。
干细胞的这种独特特性使它们成为广泛治疗应用的有前途的工具。干细胞是非特化细胞,具有自我更新和分化成特化细胞的能力。干细胞疗法是使用干细胞来治疗或预防疾病或病症。2002年报道了第一个使用干细胞疗法的临床试验,目前仍在开发中。
间充质干细胞具有转化为新型细胞的能力
一个干细胞可以变成人体中许多不同的细胞和组织。干细胞成熟为新型细胞的过程称为分化。这个过程是干细胞治疗最关键的方面,因为细胞会变成人体愈合所需的细胞类型。
干细胞也可以自我复制;这种能力允许细胞繁殖成相同的自身副本。例如,如果干细胞用于治疗神经损伤,治疗期间施用的细胞可能会变成神经细胞,然后进行复制以自行产生成倍增加的神经细胞。随着时间的推移,这种复制能力大大提高了干细胞治疗的有效性。
分化(成为新型细胞)
间充质干细胞是多能干细胞,可以自我更新并分化成不同的细胞类型。换句话说,间充质干细胞可以变成多种不同的细胞类型,包括:脂肪组织、软骨、肌肉、肌腱/韧带、骨骼、神经元和肝细胞 (8)
根据Almalki等人在2016年进行的干细胞研究。- “MSC分化为特定的成熟细胞类型受各种细胞因子、生长因子、细胞外基质分子和转录因子 (TF) 的控制。(8)
间充质干细胞有助于组织再生和分化,包括维持稳态和功能、适应改变的代谢或环境要求以及修复受损组织。(9)
干细胞像我们一样衰老
随着我们呈指数级增长,干细胞数量和有效性开始下降。例如,来自二十多岁的人的干细胞的质量远不如来自脐带组织的全新细胞。
如何利用干细胞疗法?
成人干细胞疗法可能能够治疗骨科、炎症、自身免疫和神经系统疾病,并针对克罗恩病、多发性硬化症、狼疮、慢性阻塞性肺病、帕金森氏症、肌萎缩性侧索硬化症、中风康复等进行了研究。
干细胞不一定能治愈这些疾病。前提是让身体能够很好地自我修复,以长期减轻症状。在许多情况下,仅此一项就可以显着提高患者的生活质量。
身体会排斥干细胞吗?
脐带组织来源的间充质干细胞在体内没有任何排斥风险。它们是年轻的、免疫特权的、未分化的细胞,因为它们还没有被“认领”,所以在体内没有排斥反应。
也没有与它们相关的血液制品,因此无需进行供体匹配;他们被普遍接受。这些细胞寻找体内的炎症并开始治愈受损组织。间充质脐带组织来源的干细胞已在世界各地的诊所进行了数千次给药,没有出现排斥反应(移植物抗宿主病)。
脐带组织来源的间充质干细胞 (UC-MSCs)
UC-MSCs可以来自各种领域,包括沃顿胶质、脐带内层和脐带的血管周围区域。作为一种常见的废弃组织,脐带含有丰富的间充质基质细胞来源,因此可以通过非侵入性方式获得 (5)。
“UC-MSC是最原始的MSC类型,其 Oct4、Nanog、Sox2 和 KLF4 标记的更高表达表明。” (6)
脐带组织来源的间充质干细胞具有分化成不同细胞类型的能力,并且在上述三种类型的干细胞(脂肪、骨髓、脐带组织)中具有最大的增殖率。(7)
类似于脂肪组织和骨髓来源的MSC,已知UC-MSC可以分泌生长因子、细胞因子和趋化因子,从而改善不同的细胞修复机制。(4)这些功能都有助于MSC的抗炎和免疫调节特性。
无创细胞产品
UC-MSCs的采集过程是非侵入性的,因为它不需要从患者身上提取。MSCs直接取自道德捐赠的人类脐带区域。
UC-MSC还具有比BMSC和ASC高的增殖潜力,这意味着它们在体外更有效地扩增,从而在获得更高的细胞数量时实现更高的效率。(15)
研究发现与UC-MSCs相比,与细胞增殖(EGF)、PI3K-NFkB信号通路(TEK)和神经发生(RTN1、NPPB和NRP2)相关的UC-MSCs基因上调(受体数量增加)在BM-MSC中。(15)
为什么要使用脐带组织?
脐带组织富含间充质干细胞,可用于帮助治愈、再生和治疗各种疾病。源自脐带组织的间充质干细胞 (MSC)已显示出避免人体免疫系统产生负面反应的能力,从而使这些细胞可以移植到广泛的人群中而无需担心排斥反应。这些移植物可能能够大大提高身体的自然愈合能力,并具有强大的抗炎和免疫抑制反应。如需深入比较不同的细胞类型,请查看这篇文章。
干细胞疗法有多成功?
干细胞疗法是一个相对较新且发展迅速的领域。干细胞疗法的成功率可能因治疗类型、所治疗的疾病或病症以及疾病的阶段而异。总的来说,干细胞疗法被认为是对许多病症安全有效的治疗选择,许多临床试验都显示出可喜的结果。
干细胞疗法能持续多久?
干细胞疗法改善的持续时间可能因治疗类型、所治疗的疾病或病症以及疾病的阶段而异。一些研究表明,干细胞疗法的效果可以持续数年甚至无限期,而另一些研究表明,结果可能更短暂。
此外,某些类型的干细胞疗法可能需要多次治疗才能获得最佳效果。值得注意的是,干细胞疗法是一个复杂的领域,效果持续时间因患者而异。
结论
以前无法治愈的神经退行性疾病现在可能可以通过先进的干细胞疗法进行治疗。再生医学及其益处可能是延长人类寿命的关键。
参考:
(1) Biehl、Jesse K 和 Brenda Russell。“干细胞疗法简介。” 《心血管护理杂志》,美国国家医学图书馆,2009 年 3 月, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4104807/。
(2) Zakrzewski、Wojciech 等人。“干细胞:过去、现在和未来。” 干细胞研究与治疗,BioMed Central,2019 年 2 月 26 日, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6390367/。
(3) 瓦特、Fiona M 和 Ryan R Driskell。“干细胞的治疗潜力。” 伦敦皇家学会哲学汇刊。B 系列,生物科学,皇家学会,2010 年 1 月 12 日, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2842697/。
(4) 毛飞等。“间充质干细胞及其在炎症性肠病中的治疗应用。” Oncotarget,Impact Journals LLC,2017 年 6 月 6 日,https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28402942。
(5) Walker, JT、Keating, A. 和 Davies, JE(2020 年,5 月 28 日)。干细胞:脐带/沃顿氏胶质衍生。细胞工程和再生。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7992171/。
(6) Torres Crigna, A.、Daniele, C.、Gamez, C.、Medina Balbuena, S.、Pastene, DO、Nardozi, D.、… Bieback, K.(2018 年,6 月 15 日)。以临床前模型为重点的用于治疗肾损伤的干细胞/基质细胞。医学前沿。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6013716/。
(7) Mazini, L.、Rochette, L.、Amine, M. 和 Malka, G.(2019 年,5 月 22 日)。脂肪来源的干细胞 (ADSC) 的再生能力,与间充质干细胞 (MSC) 的比较。国际分子科学杂志。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6566837/。
(8) Almalki, SG, & Agrawal, DK (2016)。间充质干细胞分化的关键转录因子。差异化;生物多样性研究。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5010472/。
(9) Grafe, I.、Alexander, S.、Peterson, JR、Snider, TN、Levi, B.、Lee, B. 和 Mishina, Y.(2018 年,5 月 1 日)。间充质分化中的 TGF-β 家族信号。生物学中的冷泉港观点。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5932590/。
(10) Jiang, W., & Xu, J.(2020 年 1 月)。间充质干细胞的免疫调节。细胞增殖。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6985662/。
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